15 typów mRNA genu wirusa brodawczaka ludzkiego E6/E7 wysokiego ryzyka
Nazwa produktu
Zestaw do wykrywania mRNA genu wirusa brodawczaka ludzkiego E6/E7 wysokiego ryzyka HWTS-CC005A-15 (fluorescencyjna reakcja łańcuchowa polimerazy)
Epidemiologia
Rak szyjki macicy jest jednym z najczęstszych nowotworów kobiecych na świecie, a jego występowanie jest ściśle związane z wirusami brodawczaka ludzkiego (HPV), jednak tylko niewielki odsetek zakażeń HPV może rozwinąć się w raka. Wirusy HPV wysokiego ryzyka infekują komórki nabłonka szyjki macicy i produkują dwa onkoproteiny: E6 i E7. Białko to może wpływać na różne białka komórkowe (takie jak białka supresorowe nowotworów pRB i p53), wydłużać cykl komórkowy, wpływać na syntezę DNA i stabilność genomu oraz zakłócać przeciwwirusową i przeciwnowotworową odpowiedź immunologiczną.
Kanał
| Kanał | Część | Przetestowano genotyp |
| FAM | Bufor reakcji HPV 1 | HPV16, 31, 33, 35, 51, 52, 58 |
| VIC/HEX | Gen ludzkiej β-aktyny | |
| FAM | Bufor reakcji HPV 2 | Wirus brodawczaka ludzkiego (HPV) 18, 39, 45, 53, 56, 59, 66, 68 |
| VIC/HEX | Ludzki gen INS |
Parametry techniczne
| Składowanie | Ciecz: ≤-18℃ |
| Okres przydatności do spożycia | 9 miesięcy |
| Typ okazu | Wymaz z szyjki macicy |
| Ct | ≤38 |
| CV | <5,0% |
| LoD | 500 kopii/ml |
| Obowiązujące instrumenty | System PCR w czasie rzeczywistym Applied Biosystems 7500Systemy PCR w czasie rzeczywistym Applied Biosystems 7500 Fast Systemy PCR w czasie rzeczywistym QuantStudio®5 Systemy PCR w czasie rzeczywistym SLAN-96P System PCR w czasie rzeczywistym LightCycler®480 System detekcji PCR w czasie rzeczywistym LineGene 9600 Plus MA-6000 Ilościowy cykler termiczny w czasie rzeczywistym System PCR w czasie rzeczywistym BioRad CFX96 System PCR w czasie rzeczywistym BioRad CFX Opus 96 |
Przepływ pracy
Zalecany odczynnik do ekstrakcji: zestaw Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA (HWTS-3020-50-HPV15) firmy Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Ekstrakcję należy przeprowadzić ściśle według instrukcji użycia. Zalecana objętość elucji wynosi 50 μl. Jeśli próbka nie została całkowicie strawiona, należy powrócić do kroku 4 w celu ponownego strawienia. Następnie należy przeprowadzić test zgodnie z instrukcją użycia.
Zalecany odczynnik ekstrakcyjny: zestaw RNAprep Pure Animal Tissue Total RNA Extraction Kit (DP431). Ekstrakcję należy przeprowadzić ściśle zgodnie z instrukcją użycia (w kroku 5 podwoić stężenie roztworu roboczego DNazy I, tj. pobrać 20 μl roztworu macierzystego DNazy I (1500 U) wolnego od RNazy do nowej probówki wirówkowej, dodać 60 μl buforu RDD i delikatnie wymieszać). Zalecana objętość elucji wynosi 60 μl. Jeśli próbka nie została całkowicie strawiona, należy ją ponownie strawić do kroku 5. Następnie przeprowadzić test zgodnie z instrukcją użycia.
