Gen oporności na karbapenemy (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nazwa produktu
HWTS-OT045 Zestaw do wykrywania genu oporności na karbapenemy (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (fluorescencyjna PCR)
Epidemiologia
Antybiotyki karbapenemowe to atypowe antybiotyki β-laktamowe o najszerszym spektrum przeciwbakteryjnym i najsilniejszym działaniu przeciwbakteryjnym.Ze względu na swoją stabilność wobec β-laktamazy i niską toksyczność stał się jednym z najważniejszych leków przeciwbakteryjnych stosowanych w leczeniu ciężkich infekcji bakteryjnych.Karbapenemy są wysoce stabilne wobec β-laktamaz o rozszerzonym spektrum za pośrednictwem plazmidów (ESBL), chromosomów i cefalosporynaz za pośrednictwem plazmidów (enzymy AmpC).
Kanał
| Mieszanka PCR 1 | Mieszanka PCR 2 | |
| FAM | CHOCHLIK | KRZEPA |
| VIC/HEX | Kontrola wewnętrzna | Kontrola wewnętrzna |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametry techniczne
| Składowanie | ≤-18 ℃ |
| Okres przydatności do spożycia | 12 miesięcy |
| Typ próbki | Plwocina, czyste kolonie, wymaz z odbytu |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/ml |
| Specyficzność | a) Zestaw wykrywa znormalizowane negatywne referencje firmy, a wyniki spełniają wymagania odpowiednich referencji. b) Wyniki testu reaktywności krzyżowej wykazują, że zestaw nie powoduje reakcji krzyżowych z innymi patogenami układu oddechowego, takimi jak Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenowirus układu oddechowego, Enterococcus lub próbki zawierające inne geny lekooporności CTX, mecA, SME, SHV, TEM itp. c) Przeciwdziałanie zakłóceniom: Do testu interferencji wybiera się mucynę, minocyklinę, gentamycynę, klindamycynę, imipenem, cefoperazon, meropenem, chlorowodorek cyprofloksacyny, lewofloksacynę, kwas klawulanowy, roksytromycynę, a wyniki pokazują, że wyżej wymienione substancje zakłócające nie wykazują reakcji zakłócającej do wykrywania genów oporności na karbapenemy KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM i IMP. |
| Obowiązujące instrumenty | Applied Biosystems 7500 Systemy PCR w czasie rzeczywistym QuantStudio®5 Systemy PCR w czasie rzeczywistym Systemy PCR w czasie rzeczywistym SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 System PCR w czasie rzeczywistym System detekcji PCR w czasie rzeczywistym LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTechnologia Bioera) Ilościowy cykler termiczny w czasie rzeczywistym MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) System PCR w czasie rzeczywistym BioRad CFX96 BioRad CFX Opus 96 System PCR w czasie rzeczywistym |
Przepływ pracy
Opcja 1.
Zalecany odczynnik do ekstrakcji: Zestaw do makro i mikrotestów General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (którego można używać z automatycznym ekstraktorem kwasu nukleinowego Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) firmy Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Dodaj 200 µl normalnej soli fizjologicznej do osad plechy.Kolejne kroki powinny być zgodne z instrukcją ekstrakcji i zalecaną objętością elucji100µl.
Opcja 2.
Zalecany odczynnik do ekstrakcji: Odczynnik do ekstrakcji lub oczyszczania kwasu nukleinowego (YDP302) firmy Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstrakcję należy rozpocząć ściśle według kroku 2 instrukcji użycia (dodaj 200 µl buforu GA do osadu plechy i potrząsaj, aż plecha zostanie całkowicie zawieszona).Do elucji należy używać wody wolnej od RNaz/DNaz, a zalecana objętość elucji wynosi 100 µl.
Opcja 3.
Zalecany odczynnik ekstrakcyjny: Odczynnik uwalniający próbki do makro i mikrotestów.Próbkę plwociny należy przemyć, dodając 1 ml soli fizjologicznej do wyżej wymienionego osadu plechy poddanego obróbce, odwirować przy 13000 obr./min przez 5 minut, a supernatant odrzucić (zachować 10–20 µl supernatantu).W przypadku czystego wymazu z kolonii i odbytu dodać 50 μl odczynnika uwalniającego próbkę bezpośrednio do wyżej wymienionego poddanego obróbce osadu plechy, a kolejne etapy należy ekstrahować zgodnie z instrukcją użycia.
